METODO CEL. LE
Técnica para
búsqueda de células LE
materiales:
tubos
de macro-hematocrito portas tubo de hemólisis con 4-8 perlas de vidrio y 1 gota
de heparina
Introducción:
El
Lupus Eritematoso Sistémico es una enfermedad autoinmune,que afecta a muchos
tejidos y órganos como articulaciones, piel, sistema nervioso, riñón, corazón,
pulmón, sangre, hígado, bazo y ojos. Las células LE son polimorfonucleares que
fagocitaron restos nucleares alterado, proveniente de la destrucción del núcleo
de otros leucocitos, por el llamado
Factor LE
(factor nuclear). Este es Ig
G-anti ADN que se fija a la superficie del núcleo y determina
alteraciones en la cromatina; y entonces al ser recubierto por anticuerpos, es
fagocitado por los neutrófilos. El objetivo es hallar neutrofilos que tengan
adherido a su superficie restos nucleares, o bien que los restos estén en su
interior.
A)
Método sin coágulo:
1-
Sacar sangre al paciente, y colocar en tubos de hemólisis con las perlas que
posean 1 gota de heparina.2- Dejarlo rotar en el agitador por 30 minutos, o
bien agitar vigorosamente por 5 a 10 minutos para generar la
lisis deleucocitos.3- Llevar la muestra a estufa de 37 ºC entre 1 a 4 horas,
para darle tiempo a los leucocitos enteros a fagocitar los restos de los lisados
y que decanten los glóbulos del plasma.4- Con la jeringa de aguja larga aspirar
la capa de leucocitos, en la interface plasma-glóbulos rojos y descargar dentro
de 2 a 4tubos de macrohematocrito.5- Centrifugar a muy baja velocidad
(500-1000 rpm), por 5minutos.6- Aspirar nuevamente con la jeringa la capa
de leucocitos de los tubos, y descargar en los portas, y realizar los extendido
conextensor.7- Colorear por el método de May Grunwald - Giemsa y ver con
microscopio